液相色谱在药物分析的应用

液相色谱不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中,可用气相色谱分析的约占20%,而80%则需用液相色谱来分析。液相色谱已经广泛应用于药物的含量测定、组成分析、质量控制等方面。近年来 液相色谱在药物分析的应用 中占主要地位。

液相色谱在天然药物及复方成药分析中的应用

ELSD能够测定没有紫外吸收或为紫外末端弱吸收的样品,天然产物中的许多成分无疑找到了直接、准确的测定方法。ELSD在天然产物及其复方成药分析中的应用报道主要有皂苷类、生物碱类、萜类内酯等。皂苷无紫外吸收或仅为末端吸收,ELSD能够对其不经衍生进行检测,在HPLC—ELSD的应用中这方面的报道zui多。主要有一次性分离分析天然人参、生脉散复方、育精胶囊中的多种人参皂苷;西洋参中的人参皂苷和拟人参皂苷定量测定;三七中的三七皂苷的含量分析;黄芪、黄芪注射液和保元汤中的黄芪皂苷、黄芪甲甙的分离和测定;麦冬中的甾体皂甙元;天麻中的天麻甙的含量测定等。这些研究主要采用Cl8柱、乙晴与水作流动相,不经衍生直接测定多组分含量,结果显示方法灵敏度高(一般检测限低于3μg/m1)、线性关系良好。对于无紫外吸收的生物碱类成分,ELSD同样显示出操作简单、灵敏度高的优点。对比HPLC—UV法测定贝母中的甾类贝母生物碱,采用ELSD检测器,不但不需衍生化操作,提高了结果的准确度,而且可检测出不含双键的贝母甲素,对动物体内的生物碱类成分如河豚du素,无紫外吸收且安全性低,不适合衍生化法,可用ELSD法进行检测,获得满意结果。银杏作为一种保健药品,其主要活性成分为黄酮类和萜类内酯,以往银杏中的萜类内酯成分主要采用HPLC—UV法和HPLC—RI测定,但由于萜类内酯紫外吸收差,又含少量物质的干扰,结果稳定性和准确性较差。随着ELSD的发展和普及,这些方法已经逐渐被ELSD法所取代。

液相色谱在抗生素分析中的应用

生产抗生素时,首先要了解发酵液中的主体与付产物的存在情况。例如:青霉素、四环素、头孢子菌素、红霉素、柔红霉素、庆大霉素等的发酵产物,均可用C18柱和甲醇及缓冲液配制的流动相或用离子对法,分析主体及其收产物的含量。对普鲁卡因酰胺、茶碱等可进行主体含量的测定,对硝酸甘油可测定主体含量及其降解产物,以便保证药物的热量。

液相色谱作为常规分析方法在药物分析中的应用

液相色谱法作为药物分析中的zui主要的分析方法,常被作为常规分析和检验方法。近年来在这个方面的研究比较多,刘树业等为时刻监控治疗肝癌时的抗癌药物剂量即血中的药物浓度,提高疗效,减少副作用,采用紫外-HPLC法对血中和组织中的阿霉素浓度进行分析。用UV-240紫外分光光度计,BECKMAN332型液相色谱仪,采用反向色谱法。针对近几年国际奥委会医学委员会公布的禁用表中新增药物及一系列利尿剂的相关化合物进行了研究,比较了不同的提取方法及回收率,研究了几种药物的排泄情况;建立了同时分析13种利尿剂的液相色谱测定方法,检出限小于5ng。用0.02mol/L的三羟甲基胺基甲烷(用磷酸调pH值至7)和甲醇(含2%乙酸和0.25%庚烷磺酸钠)作流动相进行梯度洗脱,建立了脂性油膏药物中黄芩甙含量的反相液相色谱分析方法,本法分析速度快,重现性好,黄芩甙的平均回收率为103.7%。

液相色谱在药物残留测定上的应用

由于液相色谱能够对含量复杂组分进行定量分析,被广泛使用于药物残留的测定上。以液相色谱法建立了猪、羊、鸡肝组织中西维因残留量的检测方法。采用ODS色谱柱,二极管阵列检测器,甲醇/水(65/35)为流动相,222nm检测波长下进行检测。西维因对照品溶液的zui低检测限为0.1mg/L,线性范围为0.1~20mg/L,标准曲线回归方程为:y=-22459.83+454684.31x,线性关系良好(r=0.9999)。样品以乙腈提取,并加入无水硫酸钠和正已烷,过滤后去除杂质,乙腈层在45~50℃下水浴氮气吹干,残渣用甲醇溶解后,进样分析。平均回收率均大于80%,日间和日内变异系数均小于10%。符合药物残留痕量分析要求。研究了动物源性食品中甲氧苄胺嘧啶药物残留的提取、净化和液相色谱分析条件,建立了液相色谱法测定动物性食品中甲氧苄胺嘧啶药物残留的方法,该法检测限0.025mg/kg,回收率为84%~98%。此外,在人血中药物含量的测定中也有很多的应用。建立了血浆及尿液中异烟肼的液相色谱快速测定方法,以满足临床药物分析和法医学鉴定的需要,提高对血浆及尿液中异烟肼浓度检测的准确性。以香草醛为衍生化试剂,将异烟肼经柱前衍生为异烟肼香草醛腙,直接对处理后样品中的腙进行定性、定量分析。以在空白人体液样本中定量添加标准异烟肼的方法考察了样品的前处理方法、仪器条件、线性范围、精密度、回收率等,并对健康受试者血液中的异烟肼浓度进行了监测。

液相色谱法由于分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广、组分易回收、样品处理较简单等优点在确定药方案和治疗剂量,以及药物动力学分析和药效学评价提供了方法的基础,有着广泛的应用前景。

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